【检查】山麦冬 照高效液相色谱-质谱联用法（中国药典2015年版四部通则0512）测定。
色谱条件 山麦冬皂苷B 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1%甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表1中的规定进行梯度洗脱；流速为0.25ml/min。
表1 山麦冬皂苷B梯度洗脱程序
时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
0～2 | 90 | 10 |
2～17 | 90→30 | 10→70 |
17～18 | 30→10 | 70→90 |
18～21 | 10 | 90 |
21～21.5 | 10→90 | 90→10 |
21.5～25 | 90 | 10 |
短葶山麦冬皂苷C 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10mM乙酸铵-0.1%甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表2中的规定进行梯度洗脱；流速为0.25ml/min。
表2 短葶山麦冬皂苷C梯度洗脱程序
时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
0～2 | 90 | 10 |
2～16 | 90→40 | 10→60 |
16～17 | 40→10 | 60→90 |
17～20 | 10 | 90 |
20～21 | 10→90 | 90→10 |
21～25 | 90 | 10 |
质谱条件与系统适用性试验 山麦冬皂苷B 采用电喷雾电离源（ESI），正离子方式扫描，多反应监测（MRM）；选择质荷比m/z 723.4→251.1和m/z 723.4→269.1作为山麦冬皂苷B检测离子对。
短葶山麦冬皂苷C 采用电喷雾电离源（ESI），负离子方式扫描，多反应监测（MRM）；选择质荷比m/z915.5 →737.3和m/z 915.5→ 869.4作为短葶山麦冬皂苷C检测离子对。取对照品溶液，进样2μl，上述四对检测离子对的MRM色谱峰的信噪比均应大于3:1。
供试品溶液的制备 取本品水蜜丸6g，研碎；或取大蜜丸或小蜜丸9g,剪碎。精密加甲醇50ml，称定重量，置水浴上加热回流1小时，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得。
对照品溶液的制备 取山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C对照品适量，精密称定，加合格样品基质溶液（取未掺山麦冬的样品，按供试品溶液的制备方法制备），分别制成每1ml含山麦冬皂苷B 50ng、短葶山麦冬皂苷C 450ng的溶液，即得。
测定法 山麦冬皂苷B 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪，测定，即得。
短葶山麦冬皂苷C 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪，测定，即得。
结果判定 以质荷比m/z 723.4→251.1和m/z 723.4→269.1提取的供试品离子流色谱中，应不得同时出现与山麦冬皂苷B对照品色谱保留时间一致的色谱峰；若同时出现，则供试品色谱中质荷比m/z723.4→251.1的色谱峰面积值应不得大于对照品色谱中相应的峰面积值。
以质荷比m/z915.5 →737.3和m/z 915.5→ 869.4提取的供试品离子流色谱中，应不得同时出现与短葶山麦冬皂苷C对照品色谱保留时间一致的色谱峰；若同时出现，则供试品色谱中质荷比m/z 915.5→ 869.4的色谱峰面积值应不得大于对照品色谱中相应的峰面积值。
