【指纹图谱】照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长为323nm。理论板数按白花前胡甲素计算应不低于4000。
时间(分钟) | 流动相A | 流动相B |
0-30 | 30-40 | 70-60 |
30-50 | 40-65 | 60-35 |
50-100 | 65-75 | 35-25 |
100-115 | 75-90 | 25-10 |
115-120 | 90-100 | 10-0 |
120-125 | 100 | 0 |
参照物溶液的制备取前胡对照药材约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量, 超声处理( 功率250W, 频 率 33kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为对照药材参照物溶液。
取白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素E对照品适量,精密称定,加甲醇制成每ml含白花前胡甲素80μg、白花前胡乙素40μg、白花前胡素E20μg混合对照品溶液,作为对照品参照物溶液。
供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率 33kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
供试品指纹图谱中应分别呈现相应的参照物色谱保留时间相同的色谱峰。
按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算,供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0.90。
【含量测定】方法同指纹图谱。
本品按干燥品计算,含白花前胡甲素(C21H22O7)不得少于0.90%,含白花前胡乙素(C24H26O7)不得少于0.24%。
对照指纹图谱(典型图1、2、3)
峰21:白花前胡甲素峰31:白花前胡乙素峰34:白花前胡素E